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BL21(DE3)pLysS大腸桿菌說明書
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  BL21(DE3)pLysS大腸桿菌說明書的詳細資料:

資源名稱: BL21(DE3)pLysS大腸桿菌

種屬: Escherichia coli BL21(DE3)pLysS

提供形式: 西林瓶,菌片

安全等級: 1

模式菌株: 未知

應用領域: 用于蛋白表達

培養基: LB瓊脂培養基:酵母提取物 5.0 g,蛋白胨 10.0 g,NaCl 10.0 g,瓊脂 15.0 g,蒸餾水 1.0 L,pH 7.0。121℃,15min滅菌。

生長條件: 37℃,有氧,LB
規格參數:

產品名稱

英文名稱

貨號

 BL21(DE3)pLysS大腸桿菌說明書

 Escherichi

 EY-J963232

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低溫存法:
①簡單保存法,將瓊脂斜面孢子培養物、菌絲懸浮液以及由麩皮、大米、小米等谷物原料制成的孢子培養物置于4℃冰箱保存,保存時間不超過1~2個月,若將谷物原料制備的孢子瓶抽真空并在棉塞上浸蠟,以隔絕外界空氣和水汽,保持時間可達3~4個月;②液氮超低溫保存法,將生長穩定期的細胞懸浮在10%甘油或其他低冰點液體中,密封于安瓿管內,然后控制冷卻速度,使安瓿管溫度逐步下降至 -35℃時,即可置于-150~-196℃的液氮罐中保存。大多數微生物如病毒、噬菌體、多種細菌、放線菌、酵母和原蟲、特別是一些用冷凍干燥法有困難的微生物,都可用此法保存。
微生物菌種的培養:
⒈ 孢子制備
⑴ 放線菌孢子的制備
一般采用瓊脂斜面培養基,培養基中含有一些適合產孢子的營養成分,如麩皮、豌豆浸汁、蛋白胨和一些無機鹽等。碳源和氮源不要太豐富(碳源約為1%,氮源不超過0.5%),碳源豐富容易造成酸性的營養環境,不利于放線菌孢子的形成,氮源豐富則有利于菌絲繁殖而不利于孢子形成。一般情況下,干燥和限制營養可直接或間接誘導孢子形成。放線菌斜面的培養溫度大多數為28 ℃,少數為37 ℃,培養時間為5~14天。
⑵ 霉菌孢子的制備 
霉菌的孢子培養,一般以大米、小米、玉米、麩皮、麥粒等天然農產品為培養基。這是由于這些農產品中的營養成分較適合霉菌的孢子繁殖,而且這類培養基的表面積較大,可獲得大量的孢子。霉菌的培養一般為25~28 ℃,培養時間為4~14天。
⒉ 種子制備
⑴ 搖瓶種子制備 
搖瓶種子進罐,常采用母瓶、子瓶兩級培養,有時母瓶種子也可以直接進罐。種子培養基要求比較豐富和*,并易被菌體分解利用,氮源豐富有利于菌絲生長。原則上各種營養成分不宜過濃,子瓶培養基濃度比母瓶略高,更接近種子罐的培養基配方。
⑵ 種子罐種子制備 
種子罐種子制備的工藝過程,因菌種不同而異,一般可分為一級種子、二級種子和三級種子的制備。孢子(或搖瓶菌絲)被接入到體積較小的種子罐中,經培養后形成大量的菌絲,這樣的種子稱為一級種子,把一級種子轉入發酵罐內發酵,稱為二級發酵。如果將一級種子接入體積較大的種子罐內,經過培養形成更多的菌絲,這樣制備的種子稱為二級種子,將二級種子轉入發酵罐內發酵,稱為三級發酵。同樣道理,使用三級種子的發酵,稱為四級發酵。
綜合微生物的培養方法,包括以下步驟:
1)前期準備:(A)滅菌處理;(B)制備Biolite水;(C)檢查設備和材料;
2)按比例配制培養材料;
3)導入曝氣,進行繁殖培養;
4)取液觀察;(a)取液;(b)稀釋菌液;(c)平板培養;
5)分離并檢測;
6)取液儲存;通過該綜合微生物培養方法簡單可操作性強,培養的綜合微生物均在3代以內,菌類穩定不發生突變,且繁殖快速。
Streptomyces lanatus 中文名稱:羊毛鏈霉菌Streptomyces lanatus分離基物:土壤提供形式:凍干安全等級:1模式菌株:yes應用領域:模式菌株:,產生防線菌素X復合物培養方法培養基:ISP-2培養基::酵母提取物 4.0 g,麥芽提取物 10.0 g,葡萄糖 4.0 g,瓊脂 15.0 g,蒸餾 1.0 L,pH7.3。121℃,15分鐘滅菌。生長條件:28℃,好氧 純度:98%

Morchella sp. 中文名稱:羊肚菌屬Morchella sp.提供形式:斜面培養物安全等級:1模式菌株:no應用領域:研究;。食用。培養方法培養基:綜合PDA:馬鈴薯煮汁1000mL,磷二氫鉀 3g,鎂 1.5g,葡萄糖 20g,1 10mg,瓊脂 20g,pH自然。馬鈴薯煮液:200g馬鈴薯,去皮,切塊,放入蒸餾中煮沸30min,取濾液定容至1000mL,備用。121℃,15min。傳代方法①凍干管:75%酒精擦拭管壁,后用砂輪在凍干管壁劃兩圈,掰斷,用200μL無菌或培養基:充分溶解,平板涂布,活化培養。 ②斜面:試管口用75%酒精擦拭后,火焰灼燒,后用無菌接種鏟切塊,挑取接入平板或斜面,培養。生長條件:25℃,好氧。生長特性8天長滿斜面,菌絲灰白色、稀疏。存儲條件:液氮超低溫凍結法;定期移植法 純度:98%

Cordyceps│militaris 中文名稱:蛹蟲草(北冬蟲夏草,北蟲草)Cordyceps│militaris提供形式:斜面培養物安全等級:1模式菌株:no應用領域:、藥用,適合液體發酵菌絲體。培養方法培養基:CM0017生長條件:25℃存儲條件:液氮超低溫凍結法;定期移植法 純度:97%

Cordyceps militaris 中文名稱:蛹蟲草(北冬蟲夏草,北蟲草)(斜面)Cordyceps militaris提供形式:斜面培養物/凍干物安全等級:1模式菌株:no應用領域:研究;。、藥用,適合液體發酵菌絲體。培養方法培養基:綜合PDA瓊脂:馬鈴薯提取液 1.0L,葡萄糖 20.0g,KH2PO4 3.0g,MgSO4.7H2O 1.5g,1 微量,瓊脂 15.0g,pH6.0。生長條件:25℃,好氧生長特性15天長滿斜面,菌絲潔白、濃密、豐厚、菌絲絨毛狀。液體深層發酵溫度23-25℃,pH值為5.5-7,發酵周期3-5天。存儲條件:2-8℃,定期移植法,液氮超低溫凍結法; 純度:97%

Campylobacr coli 中文名稱:結腸彎曲菌Campylobacr coli分離基物:狨猴的糞便提供形式:凍干物安全等級:2模式菌株:no應用領域:《GB4789.28培養基:和試劑的質量要求》標準菌株。質控菌株,腸道和新興傳染病研究。培養方法培養基:1、哥倫比亞血平板 2、TSA+5%脫纖維羊血生長條件:37℃,微需氧存儲條件:真空冷凍干燥法 純度:96%

Rhizobium arachis 中文名稱:花生根瘤菌Rhizobium arachis安全等級:1模式菌株:no培養方法培養基:根瘤菌培養基::Yeast eztract (酵母膏) 1g Soil eztract (土壤浸提液) 200ml Mannitol () 10g Agar (瓊脂) 15g Distilled war (蒸餾) 800ml pH 7.2[No]:Soil extract:Suspend 50g finely and dried gardon soil in 200ml of tap war. Autoclave at 121℃ for 1 hr. Decant through cotton-cloth, filler though paper, make up volume to 200ml. Resrilize for 20 minus at 121℃ , then mixed with othringredients and distribud. (土壤浸提液的制法:取土壤50克,加200毫升,15磅蒸煮1小時,經濾紙過濾后加補足到200毫升。)生長條件:25-28℃,好氧,48h 純度:96%

Actinomyces oris = Actinomyces viscosus 中文名稱:粘性放線菌Actinomyces oris = Actinomyces viscosus分離基物:人類痰提供形式:凍干安全等級:1模式菌株:no培養方法培養基:哥倫比亞血平板,建議購買即用型平板。生長條件:37℃,5%CO2,鏡檢為陽性桿菌,純.24h 純度:96%

Azotobacr vinelandii 中文名稱:棕色固氮菌Azotobacr vinelandii提供形式:凍干安全等級:1模式菌株:no培養方法培養基:胰胨大豆瓊脂(TSA):胰蛋白胨(酪蛋白消化物) 15.0g,大豆蛋白胨(大豆木瓜蛋白酶消化物) 5.0g, 5.0g,瓊脂 15.0g,pH7.3±0.2。121℃,15min。生長條件:30℃,好氧 純度:98%
BL21(DE3)pLysS大腸桿菌說明書孟加拉紅(虎紅)培養基人臍動脈平滑肌細胞外周血白細胞ABL1(v-abl Abelson murine leukemia viral oncogene homolog 1)  ABL1抗原

KF鏈球菌瓊脂大鼠垂體細胞胰島β細胞FUCA1/Alpha L fucosidase I peptide  α-L巖藻糖苷酶抗原

KF鏈球菌瓊脂大鼠腦膜細胞胰腺星狀細胞Rabbit IgG/Alexa Fluor 647  Alexa Fluor 647標記兔IgG(細胞流式同型對照)

BCYE瓊脂基礎大鼠腦脊神經元胰腺導管上皮細胞Bassoon(BSN)  

GVPC瓊脂基礎大鼠皮質神經元頜下腺上皮細胞Bax peptide  Bax(多肽抗原)

GVPC添加物大鼠顆粒細胞腮腺細胞Leptin peptide/FITC  熒光素FITC標記瘦素抗原

胰蛋白胨大豆瓊脂(TSA)大鼠海馬神經元視網膜微血管內皮細胞Bcl-2(抗原)  Bcl-2(多肽抗原)

改良平板計數瓊脂(MPCA)大鼠黑質神經元小梁網細胞BDNF (Brain-derived Neurotrophin factor)  腦源神經營養因子(腦衍化神經營養因子)(多肽片斷抗原)

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